El Microscopio – Emisión 183

02/12/2015

Programa183-LogoGrande — El Microscopio - Emisión 183

02 de Diciembre de 2015

Entrevista con el Lic. Juan Carlos Navarro (Venezuela), Entomólogo molecular en Salud Pública, sobre el virus Zika en América.
Entrevista con la Dra. Hilda Matarira (Zimbawe), Secretaria de la Federación Africana de Química Clínica y Medicina de Laboratorio, nos comenta sobre las últimas novedades del Virus del Ébola.
Historia de Walter Reed.
Libros de James O. Westgard en la Biblioteca Académica Virtual, donados por la Fundación Wallace H. Coulter.
Fundación Wallace H. Coulter.
Sección Reporte Epidemiológico.
Noticias, eventos y novedades relacionadas a la Bioquímica Clínica.

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Listado de emisiones anteriores

Entrevista con la Dra. Hilda Matarira (Zimbawe): Últimas novedades del Virus del Ébola

02/12/2015

Hilda Matarira es Secretaria de la Federación Africana de Química Clínica y Medicina de Laboratorio. Es bioquímica en Zimbawe, África. En esta oportunidad, la Dra. Hilda Matarira nos comenta sobre las últimas novedades del virus ébola.

Entrevista con el Lic. Juan Carlos Navarro (Venezuela): Virus Zika en América

02/12/2015

El Lic. Juan Carlos Navarro es Biólogo en Ecología de Vectores, Entomólogo molecular en Salud Pública doctorado por la Universidad Central de Venezuela. Su Área de investigación es la Biodiversidad en vectores y patógenos, Filogenética, Evolución y Eco-epidemiología de Arbovirus emergentes y re-emergentes. Es Profesor Investigador Emeritus en la Universidad Central de Venezuela, Instituto de Zoología y Ecología Tropical, Laboratorio de Biología de Vectores y Parásitos. Caracas, Venezuela. Investigador Asociado al Centro Internacional de Zoonosis, UCE, Quito, Ecuador.

Alerta Epidemiológica: incremento de microcefalia en el Nordeste de Brasil

02/12/2015

Microcefalia CIE-10: Q02

Es un trastorno neurológico en la que la circunferencia occipitofrontal es menor de acuerdo a la que corresponde por edad, raza y sexo. Se define como una circunferencia de cabeza con 2 desviaciones estándar (DE) por debajo de la media para la edad y el sexo o aproximadamente menor que el segundo percentil. La microcefalia puede ser causada por una variedad de factores genéticos y ambientales. Los niños con microcefalia pueden presentar problemas de desarrollo. En general, no hay tratamiento para la microcefalia, pero la intervención temprana puede ayudar a mejorar el desarrollo y la calidad de vida del niño.

Resumen de la situación

En octubre de 2015 el Ministerio de Salud de Brasil informó acerca de un incremento inusual de casos de microcefalia en el estado de Pernambuco, nordeste del país. En promedio, en este estado se registraban 10 casos de microcefalia por año. Sin embargo, desde inicio de este año hasta el 11 de noviembre de 2015 se detectaron 141 casos de microcefalia en 44 de los 185 municipios del estado de Pernambuco.

El Ministerio de Salud de Brasil informó que una situación similar se registra en los estados de Paraíba₁ y Rio Grande do Norte. En el estado de Rio Grande do Norte se registraron 35 casos de microcefalia desde agosto de 2015 al 16 de noviembre de 2015₂. Más recientemente el estado de Piauí₃ informó también un incremento inusual.

Ante esta situación, el Ministerio de Salud de Brasil declaró una emergencia nacional de salud pública₄.

Las autoridades de salud de Brasil están llevando a cabo una investigación para determinar la causa del evento. Se realizan análisis clínicos, de laboratorio, y ultrasonido a las madres y a los recién nacidos.

Orientaciones para las autoridades de salud pública

A pesar de que la(s) causa(s) de este evento aún no han sido determinadas, se comparte esta información con los Estados Miembros a fin de dar a conocer la situación y a la vez requerir que estén atentos ante la ocurrencia de eventos similares en sus territorios.
Por ello, y para contribuir con el conocimiento de la etiología de este evento, la OPS/OMS solicita a los Estados Miembros a que notifiquen todo incremento de microcefalias u otro trastorno neurológico en recién nacidos, que no pueda ser explicado por una causa conocida.

Vigilancia e investigación

Se recomienda analizar la base de datos de nacidos vivos, específicamente en lo relacionado a malformaciones/trastornos neurológicos, con el objetivo de detectar algún incremento inusual. La vigilancia de las microcefalias ha de estar integrada en la vigilancia de las malformaciones congénitas. Esta vigilancia ha de ser continua, para conocer la magnitud y carga debidas a estas alteraciones.

No existen valores absolutos para definir la microcefalia dado que la misma varía según la raza, el sexo y la edad gestacional. Por esa razón, a continuación se ofrecen las tablas de la OMS en las que se pueden encontrar los percentiles, así como también instrucciones para construir las tablas nacionales, disponible en: http://www.who.int/childgrowth/standards/hc_for_age/en/.

Todo incremento de microcefalia u otro trastorno neurológico congénito debe ser analizado e investigado.

Manifestaciones clínicas y atención de casos

Los niños con microcefalia a menudo presentan otras discapacidades concurrentes. Se han descrito diferentes síntomas y signos asociados a microcefalia (apariencia muy pequeña de la cabeza, dificultades en la alimentación, llanto en tono agudo, convulsiones, espasticidad de brazos y piernas, retrasos en el desarrollo y discapacidad intelectual, entre otros). Los niños con sospecha de microcefalia siempre han de ser evaluados por un profesional de salud. Además de la evaluación clínica se suele requerir una prueba de neuroimagen para valorar las posibles lesiones estructurales.
No existe un tratamiento específico para esta condición, pero los niños con microcefalia que muestran un retraso en el desarrollo podrían beneficiarse de programas de intervención temprana o terapia de desarrollo físico y ocupacional; así como de programas interdisciplinarios.

Bibliografía

Organización Mundial de la salud. Child growth standards: Head circumference-for-age. Disponible en inglés: http://www.who.int/childgrowth/standards/hc_for_age/en/
Harris, S.R. Measuring head circumference, Update on infant microcephaly. Can Fam Physician 2015; 61:680-4.
WHO/CDC/ICBDSR. Birth defects surveillance: a manual for programme managers.
Geneva: World Health Organization; 2014. Disponible en inglés: http://www.who.int/nutrition/publications/birthdefects_manual/en/

Referencias

Secuenciador portátil del ADN detecta infecciones virales en muestras de sangre

02/12/2015

Se usó un secuenciador portátil del ADN con nanoporos para identificar y diferenciar con exactitud los virus presentes en las muestras de sangre de pacientes, con un tiempo de respuesta sin precedentes de menos de seis horas, desde el recibo de la muestra hasta la entrega del resultado.

El secuenciador con nanoporos MinION de Oxford Nanopore Technologies (Oxford, Reino Unido), determina rápidamente la secuencia del ADN de una muestra, a través de la aplicación de una tecnología de nanoporos de proteínas. El método se basa en un canal de proteínas, de sólo unos pocos nanómetros de diámetro, a través del cual solo puede pasar una hebra del ADN. A medida que esa cadena del ADN pasa a través de los nanoporos, genera una serie de firmas eléctricas características, con las cuales se puede identificar cada una de las bases de nucleótidos y determinar así la secuencia de cada hebra. El instrumento es alimentado con energía y operado mediante un computador portátil, a través de una conexión USB.

Investigadores de la Universidad de California en San Francisco (EUA) utilizaron un instrumento MinION para analizar las muestras de sangre de cuatro pacientes con el fin de detectar el virus del Chikungunya (CHIKV), el virus del Ébola (EBOV) y el virus de la hepatitis C (VHC).

Se informó que a altas concentraciones, en el rango entre 107 y 108 copias por mililitro, se detectaron lecturas para EBOV de dos pacientes con fiebre hemorrágica aguda y para CHIKV de un donante asintomático de sangre, en un lapso de 4 a 10 minutos luego de la adquisición de la información, mientras que ante títulos más bajos del virus VHC (1×105 copias por mililitro) se logró la detección en 40 minutos. Se obtuvo una confirmación de esos resultados mediante la secuenciación con un instrumento MiSeq de Illumina Inc. (San Diego, CA, EUA).

La secuenciación con nanoporos es una tecnología de secuenciación de tercera generación que tiene dos ventajas clave frente a las tecnologías de segunda generación: las lecturas son más extensas y se puede realizar el análisis de la secuencia en tiempo real. A mediados de 2015, el secuenciador con nanoporos MinION fue capaz de producir al menos 100.000 secuencias con una longitud media de lectura de cinco kilobases, con una producción total de hasta un gigabase de secuencia en 24 horas, en una celda de flujo.

En el estudio actual, los investigadores presentaron el uso esa secuenciación con nanoporos con el fin de lograr la detección metagenómica de esos patógenos virales, a partir de muestras clínicas con un tiempo de respuesta de menos de seis horas, desde el recibo de la muestra hasta la entrega de los resultados. También introdujeron el MetaPORE, una herramienta basada en la web para la visualización y el análisis de la secuencia en tiempo real, que permite la identificación de los patógenos a partir de la información de los nanoporos.

“Hasta donde sabemos, esta es la primera vez que la secuenciación con nanoporos ha sido utilizada para la detección metagenómica en tiempo real de los patógenos presentes en muestras clínicas complejas, en el ámbito de las infecciones humanas”, dijo el autor principal, el Dr. Charles Y Chiu, profesor asociado de medicina de laboratorio de la Universidad de California en San Francisco. “Las pruebas sin sesgo, que permiten detectar los patógenos en el punto de atención, con una secuenciación metagenómica rápida, tienen el potencial de transformar radicalmente el diagnóstico de las enfermedades infecciosas en los ámbitos, tanto clínicos como de salud pública. Esta tecnología genómica para el punto de atención será particularmente atractiva para los países en desarrollo, donde a menudo son muy escasos los recursos críticos, como la energía eléctrica confiable, el espacio del laboratorio y la capacidad del servidor de sistemas.

El estudio fue publicado en la edición en línea del 29 de septiembre de 2015 de la revista Genome Medicine.

Fuente: LabMedica

Microscopio plástico de bajo costo para muestras con naranja de acridina

02/12/2015

Un microscopio acromático, en miniatura, de bajo costo, ha sido fabricado para la identificación de linfocitos, monocitos y granulocitos en muestras de sangre total coloreadas con naranja de acridina.

El recuento diferencial de los glóbulos blancos (WBC) es un componente del hemograma (CBC), una evaluación realizada en la investigación estándar de la sangre. El recuento diferencial WBC es esencial en los puntos de atención, cuando se quieren determinar las anomalías cuantitativas en las poblaciones de los glóbulos blancos, por el contrario morfológicamente normales, una condición que puede ocurrir con ciertas enfermedades infecciosas.

Bioingenieros de la Universidad de Rice (Houston, TX, EUA) desarrollaron un microscopio acromático, en miniatura, optimizado para los máximos de emisión máxima del naranja de acridina, unido al ADN y el ácido ribonucleico (ARN) a 525 nm y 650 nm, respectivamente. Fue diseñado específicamente para la observación y la clasificación de los glóbulos blancos de la sangre en muestras de sangre total no diluida, coloreadas con naranja de acridina. Mediante la optimización de un microscopio para estos picos de emisión, los científicos fueron capaces de cuantificar los leucocitos en una muestra que consiste solamente en 20 µL de colorante, 20 µL de sangre total, y un portaobjetos de vidrio con un cubreobjetos. El objetivo de microscopio por encargo, fue fabricado de plástico a través de la inflexión de una punta de diamante única para los propósitos de fabricación rápida del prototipo. La inflexión individual de la punta de diamante produce lentes de plástico con rugosidad superficial de calidad óptica.

Los sustratos de plástico para las lentes fabricadas a medida fueron seleccionados cuidadosamente para minimizar la aberración cromática axial. El objetivo de plástico se integró en una carcasa totalmente de plástico, impresa en 3D. Una vez que el objetivo se ajustó inicialmente a la distancia de trabajo adecuada utilizando la optomecánica impresa en 3D, el sistema requiere ajustes manuales adicionales para reenfocar la óptica entre distintas muestras. Puesto que la muestra estaba compuesta de sangre, no diluida, coloreada de forma fluorescente, sólo era necesario un campo de visión para capturar la información estadísticamente significativa de más de 100 leucocitos/campo de visión con respecto a los distintos tipos de glóbulos blancos. El microscopio digital clasifica los tipos de leucocitos (linfocitos, monocitos, granulocitos) basado en la relación de intensidad rojo a verde dentro de cada célula, en lugar de la morfología.

La construcción del microscopio prototipo, que también incluye una fuente de luz LED, una fuente de alimentación, una unidad de control, un sistema óptico, y el sensor de imagen, cuesta menos de 3.000 dólares. En los niveles de producción de más de 10.000 unidades, los científicos calculan que este precio caería a alrededor de 600 dólares por cada unidad, con un costo por prueba de unos pocos centavos. Tomasz Tkaczyk, PhD, profesor asociado y autor principal del estudio, dijo: “Uno de los aspectos de importanciapara el proyecto es el costo de la preparación de la muestra o la muestra misma. Muchos de los sistemas, que funcionan para aplicaciones de puntos de atención utilizan cartuchos muy caros. El objetivo de este estudio es hacer posible que para aquellos en las zonas empobrecidas se puedanrealizar las pruebas que necesitan los pacientes a un precio manejable”. El estudio fue presentado en el congreso de Fronteras en Óptica 2015, celebrado en octubre 18-22, 2015, en San José (CA, EUA).

Fuente: LabMedica

Diagnóstico directo de Candida con RM miniaturizada

02/12/2015

Un novedoso método para el diagnóstico de la infección por Candida directamente a partir de muestras de sangre, se basa en una tecnología miniaturizada de resonancia magnética y no requiere ningún pretratamiento ni extracción de la muestra.

T2 Biosystems, Inc. (Lexington, MA, EUA) presentó su Panel T2Candida, diseñado para ser utilizado en la plataforma de resonancia magnética T2 (T2MR), el T2Dx, en San Diego (California, EUA), durante la reciente reunión conjunta de la Conferencia Intercientífica sobre Agentes Antimicrobianos y Quimioterapia (ICAAC) y la Sociedad Internacional de Quimioterapia (ICC).

La T2MR utiliza una tecnología de resonancia magnética miniaturizada, que mide cómo reaccionan las moléculas de agua en presencia de campos magnéticos. Para objetivos moleculares y de inmunodiagnóstico, aprovecha los avances en el campo de la nanotecnología mediante el uso de partículas con propiedades superparamagnéticas que mejoran las señales de resonancia magnética de eventos de unión específicos. Cuando a una muestra que contiene el objetivo se le añaden partículas recubiertas con agentes de unión dirigidos a esos destinatarios específicos, dichas partículas se unen y se agrupan alrededor del objetivo. Esta agrupación cambia el entorno microscópico de las moléculas de agua presentes en la muestra, lo cual a su vez altera la señal de resonancia magnética y la señal de relajación T2 que se mide y de este modo se indican la presencia o la ausencia o la concentración del objetivo.

A diferencia de la mayoría de los métodos de detección, la T2MR puede identificar con rapidez y exactitud los objetivos moleculares en las muestras de los pacientes, sin necesidad de efectuar la extracción ni la purificación de las moléculas objetivo de la muestra.

En un estudio clínico, se obtuvieron las muestras de 23 pacientes en el día de la inscripción y en los días tres, cinco y siete. Los resultados de las pruebas de hemocultivo y de T2Candida fueron comparados para determinar cuál método resultaba más exacto para hacer el seguimiento de dichos pacientes.

Los resultados revelaron que el T2Candida mostró una mayor exactitud para la detección de la candidiasis invasiva y de la presencia de una infección por Candida, ya que reportó 17 resultados positivos durante el período de las pruebas, para nueve pacientes con candidemia que estaban recibiendo tratamiento antimicótico, mientras que el hemocultivo informó sólo tres resultados positivos dentro del mismo grupo de pacientes. En general, la prueba T2Candida mostró una sensibilidad de 91,1 %, una especificidad de 99,4 % y un límite de detección tan bajo como una UFC/ml (unidad formadora de colonia por mililitro).

“Otros estudios anteriores han demostrado que el hemocultivo puede producir resultados falsos negativos cuando los pacientes están recibiendo tratamiento antimicótico”, dijo John McDonough, presidente y director general de T2 Biosystems. “Los resultados de este estudio demuestran que el T2 Candida puede proporcionar resultados más exactos para los pacientes que están recibiendo tratamiento antimicótico, lo cual les puede permitir a los médicos tomar mejores decisiones sobre el tratamiento en cuanto a la duración del tratamiento y al control de la fuente de la infección, incluidos los procedimientos de cateterismo y otras intervenciones médicas de las cuales se sabe que pueden producir esta enfermedad”.

Los detalles de la comparación de la eficacia del panel T2Candida con la del hemocultivo fueron publicados en la edición en línea del 15 de septiembre de 2015, de la revista Future Microbiology.

Fuente: LabMedica

Alerta Epidemiológica: incremento de microcefalia en el Nordeste de Brasil

01/12/2015

Ante el incremento inusual de casos de microcefalia en algunos estados del nordeste de Brasil, la Organización Panamericana de la Salud (OPS) / Organización Mundial de la Salud (OMS) solicita a los Estados Miembros que estén vigilantes a la ocurrencia de eventos similares y a que lo notifiquen a través de los canales establecidos en el Reglamento Sanitario Internacional.